Медицинский эксперт статьи
Новые публикации
13с уреазный тест: подготовка, результаты, положительный, отрицательный
Последняя редакция: 23.04.2024
Весь контент Web2Health проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.
У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.
Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.
Со времени выявления ассоциируемой с хроническим гастритом и язвами желудка и двенадцатиперстной кишки бактерии Helicobacter pylori были разработаны методы ее диагностики, в том числе уреазный тест, который позволяет обнаружить данные микроорганизмы у конкретного пациента, подтвердить их причастность к развитию гастроэнтерологических заболеваний и назначить эффективное лечение.
Фермент уреаза как биомаркер хеликобактерной инфекции
Бактерии H. pylori защищаются от кислой среды в просвете желудка двумя способами. Во-первых, повреждая слизистую оболочку своими жгутиками, микроорганизмы добираются в ее нижние слои, вплоть до эпителиальных клеток, где рН выше (то есть кислотность ниже). Во-вторых, бактерии нейтрализует кислоту, синтезируя в больших количествах каталитически активный высокомолекулярный металлофермент уреазу или мочевинную амидогидролазу.
Использование уреазы при диагностике хеликобактеров возможно вследствие не только цитоплазматической активности данного фермента, но и внешнего взаимодействия с клетками-хозяевами.
Под действием уреазы происходит расщепление мочевины желудка до нитрида водорода (аммиака) и двуокиси углерода (углекислого газа). Они реагируют с соляной кислотой желудочного сока и обеспечивают вокруг H. pylori зону с нейтральной кислотностью, а также поддерживают метаболизм бактериальных клеток.
Вот почему уреаза является важнейшим фактором колонизации H. pylori слизистой оболочки желудка человека, а выявление уреолитической активности считается биомаркером вирулентности данной бактерии, который гастроэнтерологи – проводя уреазный тест – используют для диагностики хеликобактерной инфекции, а также для контроля результатов медикаментозного уничтожения (эрадикации) бактерий.
Диагностика H. pylori включает инвазивные и неинвазивные тесты – в зависимости от того, требуется ли эндоскопическое обследование желудка (фиброгастродуоденоскопия) или нет. Инвазивным тестом является быстрый уреазный тест или экспресс-тест на уреазу (RUT-test), который требует получения образцов тканей (биопсии). 13С уреазный дыхательный тест (13C-UBT) – наиболее распространен среди неинвазивных тестов.
Следует отметить, что неинвазивную диагностику H.pylori можно провести с помощью анализа крови на антитела (специфичность на уровне 75%, чувствительность – 84%), анализа мочи ELISA (с чувствительностью 96% и специфичностью 79%), копрограммы на антигены бактерии. Больше информации – Инфекция Helicobacter pylori: антитела к Helicobacter pylori в крови
[Показания уреазного теста
Сама по себе колонизация слизистой желудка H. pylori не является заболеванием, это фактор повышенной бактериальной нагрузки на организм, которая при определенных условиях может дать толчок развитию ряда патологий желудка и верхнего отдела ЖКТ.
Показания к проведению диагностики хеликобактерной инфекции, в частности, уреазного теста, связаны с гастритом с повышенной кислотностью, антральным и атрофическим гастритами, дуоденитом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, желудочной MALT-лимфомой. После эндоскопической резекции рака желудка ранней стадии может проводиться гистологическое исследование в сочетании с быстрым уреазным тестом – ФГДС с уреазным тестом.
Гастроэнтерологи могут назначать уреазный тест при жалобах пациентов на ощущение тяжести и дискомфорта в эпигастральной области, на частые изжоги после приема пищи, на отрыжку кислым или тухлым, на горечь во рту, тошноту, кишечные расстройства, ноющие или схваткообразные боли в желудке.
Подготовка
Подготовка к 13С уреазному дыхательному тесту заключается в том, что пациент должен прекратить: прием антибиотиков за 4 недели до тестирования, а НПВС, препараты группы ингибиторов протонного насоса (снижающие кислотность желудка) и применяемые при изжоге антациды или адсорбенты – минимум за две недели. Прием любых медпрепаратов следует прекратить за пять-шесть дней, а употребление спиртосодержащих напитков и курение – за трое суток до теста.
Также примерно за неделю до тестирования рекомендуется не употреблять в пищу бобовые культуры, поскольку в фасоли, горохе, чечевице, сое и бобах имеется уреаза (которая защищает растения от болезней и насекомых-вредителей).
Вечером накануне теста противопоказан поздний плотный ужин; в день тестирования нужно провести обычную гигиену полости рта, а за час-полтора перед анализом не следует ничего пить или использовать жвачку.
К кому обратиться?
Техника проведения уреазного теста
Техника проведения:
- сначала берется образец базового дыхания – делается выдох в мягкую пластиковую емкость (и герметично закрывается);
- принимается внутрь жидкость с добавлением 13C-мочевины;
- через 25-30 минут берется второй образец выдыхаемого воздуха – в другой контейнер.
Полученные таким образом образцы анализируются на масс-спектрометре с разделением изотопов во втором образце и определением их концентрации. Разность между значениями во втором и первом образце выражается как дельта (δ) по сравнению с базовым уровнем. Нормальные показатели, то есть отрицательные значения меченого атома 13С у неинфицированных пациентов варьируются 0,15-0,46%, а положительные значения при наличии инфекции составляют 1,2-9,5% со скоростью гидролиза мочевины более 12-14 мкг/мин.
А если проще: обнаружение меченого изотопом 13С углекислого газа в выдыхаемом воздухе указывает на то, что мочевина подверглась гидролизу уреазным ферментом H. pylori, что, собственно, и подтверждает факт ее присутствия в желудке.
Дыхательный тест на H. pylori
Тест 13C-UBT или 13С уреазный дыхательный тест на хеликобактер пилори является одним из наиболее важных неинвазивных методов выявления данной инфекции: при 100%-й чувствительности и специфичности 98% риск ложноположительных и ложноотрицательных результатов по сравнению с гистологией и анализом крови на антитела ниже на 2,3%.
В основе анализа лежит гидролиз уреазой H. pylori перорально вводимой жидкой мочевины, меченной атомом (стабильным нерадиоактивным изотопом) углерода 13C (50-75 мг 13C-мочевины, разбавленной 100 мл жидкости).
Мочевина, маркированная изотопным индикатором, в желудке подвергается гидролизу с выделением аммиака и содержащей меченые атомы двуокиси углерода, которая диффундирует в кровь и при дыхании выводится из легких. Меченый углекислый газ фиксирует аппарат для проведения анализа – масс-спектрометр, действие которого основано на недисперсионной изотопселективной спектроскопии, либо инфракрасный спектроскопический анализатор.
Быстрый уреазный тест
Быстрый уреазный тест (Rapid Urease Test или RUT) проводится в ходе эндоскопического обследования желудка и двенадцатиперстной кишки – с использованием современных эндофиброскопов – и одновременного взятия биопсийных образцов. Биоматериал положено брать из антральной части желудка. Так что фиброгастродуоденоскопия или ФГДС с уреазным тестом является инвазивным диагностическим методом.
Полученный биоптат полностью погружают в готовую стандартизированную среду, содержащую агаровый гель, мочевину, кислотно-щелочной индикатор фенолсульфофталеин и бактериостатик (добавляемый для предотвращения роста загрязняющих микроорганизмов и ложноположительных результатов).
Если в образце ткани желудка присутствуют бактерии H. pylori, продуцируемая ими уреаза будет гидролизовать мочевину и повысит pH, что отчетливо видно по изменению желтого цвета индикатора на оранжевый (при рН 6,8) и пурпурный (при рН>8) 75% положительных тестов меняют цвет за 120-180 минут, и чем быстрее индикатор меняет цвет, тем численность бактерий больше. Но тесты, которые кажутся отрицательными, выдерживают в течение 24 часов.
Быстрый уреазный тест положительный, что это такое? Положительный тест RUT – покраснение индикатора – означает, что в помещенном в агаровую среду образце биопсии находится минимум 105 бактерий H. pylori, хотя обычно их концентрация выше.
Чувствительность различных модификаций тестов варьируется в диапазоне 90-98%, а специфичность – 97-99%.
Как отмечают гастроэнтерологи, если у пациента в заключении указан резко положительный уреазный тест (поставлены три крестика), то это означает: рН>8, и индикатор изменил цвет менее чем за 60 минут с момента погружения биоптата, что свидетельствует о большом количестве H.pylori и высоком уровне экспрессии уреазы. Приблизительное число бактерий может быть подсчитано при гистологическом исследовании биоптата под микроскопом, и если на визуализируемом участке оно превышает 40-50, уровень заражения считается высоким.
13С уреазный дыхательный тест редко дает ложноположительные результаты, и у пациентов с подозрением на язвенную болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки один положительный тест считается подтверждением диагноза, тогда как отрицательный результат должен подтверждаться результатами ФГДС с уреазным тестом.
Использованная литература