Антитела к нуклеарным антигенам (антинуклеарный фактор) в крови

У здоровых людей титр антител к нуклеарным антигенам в сыворотке крови 1:40-1:80 (клинически значимый титр - ≥1:160 при использовании метода непрямой иммунофлюоресценции; при использовании скрининговых методов - ниже 1:50).

Антинуклеарный фактор - антитела к цельному ядру. Это гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами ядра. Определение антител к нуклеарным антигенам в сыворотке крови - тест на системные заболевания соединительной ткани. Скрининг на наличие антинуклеарных антител в сыворотке крови проводят методом радиоиммунного анализа (РИА), реакции связывания комплемента (РСК) или ИФА.

Положительные результаты скрининга должны быть подтверждены методом непрямой иммунофлюоресценции. В качестве клеточного субстрата используют препараты, приготовленные из суспензии клеток с крупными ядрами [из человеческих клеток линии НЕp-2 (human epithelial cells) - клетки рака гортани, или срезов мышиной печени]. Тип окрашивания (характер распределения флюоресцентной метки в клетках) при разных заболеваниях неодинаков и определяет направление дальнейшего установления специфичности антинуклеарных антител.

• Диффузное окрашивание (равномерное распределение метки) наименее специфично, возможно при системной красной волчанке, лекарственном волчаночном синдроме и других аутоиммунных заболеваниях, а также у пожилых лиц. При диффузном окрашивании клеток реакцию необходимо повторить с большим разведением исследуемой сыворотки крови. Если тип окрашивания остаётся прежним, наиболее вероятно, что антиген против которого направлены антинуклеарные антитела, дезоксирибонуклеопротеид.
• Гомогенное или периферическое окрашивание наблюдают, когда в исследуемой сыворотке крови преобладают антитела к двухспиральной ДНК. Этот тип окрашивания наиболее часто обнаруживают при системной красной волчанке.
• Пятнистое или крапчатое окрашивание обусловлено антителами к экстрагируемым ядерным антигенам и обычно наблюдается при смешанном заболевании соединительной ткани, синдроме Шёгрена, лекарственном волчаночном синдроме.
• Ядрышковое (нуклеолярное) окрашивание (распределение метки в районе ядрышек) обусловлено антителами к рибонуклеопротеиду (см. ниже). Этот тип окрашивания характерен для системной склеродермии, изредка возможен и при других аутоиммунных заболеваниях.
• Центромерное или дискретное крапчатое окрашивание обусловлено антителами к центромере (специализированный домен хромосом) и характерно для CREST-синдрома и других аутоиммунных ревматических заболеваний.

Основная цель исследования на антинуклеарные антитела - выявление системной красной волчанки, поскольку при этом заболевании они появляются в сыворотке крови 95% больных в течение 3 мес после его начала.

Определение антител к нуклеарным антигенам имеет большое значение для диагностики коллагенозов. При узелковом полиартериите титр (при использовании скрининговых методов) может увеличиваться до 1:100, при дерматомиозите - до 1:500, при системной красной волчанке - до 1:1000 и выше. При системной красной волчанке тест на выявление антинуклеарного фактора обладает высокой степенью чувствительности (89%), но умеренной специфичностью (78%) по сравнению с тестом на определение антител к нативной ДНК (чувствительность 38%, специфичность 98%). Антитела к нуклеарным антигенам высокоспецифичны для системной красной волчанки. Сохранение высокого уровня антител в течение длительного времени - неблагоприятный признак. Снижение титра предвещает ремиссию или (иногда) летальный исход.

При склеродермии частота выявления антител к нуклеарным антигенам составляет 60-80%, однако титр их ниже, чем при системной красной волчанке. Между титром антинуклеарного фактора в крови и степенью тяжести заболевания взаимосвязь не прослеживается. При ревматоидном артрите часто выделяют СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляют антителак нуклеарным антигенам. При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживают в 20-60% случаев (титр до 1:500), при узелковом полиартериите - в 17% (1:100), при болезни Шёгрена - в 56% при сочетании с артритом и 88% случаев при синдроме Гужеро-Шёгрена. При дискоидной красной волчанке антинуклеарный фактор выявляют у 50% больных.

Помимо ревматических заболеваний, антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживают при хроническом активном гепатите (в 30-50% случаев), причём их титр иногда достигает 1:1000. Аутоантитела к нуклеарным антигенам могут появиться в крови при инфекционном мононуклеозе, острых и хронических лейкозах, приобретённой гемолитической анемии, болезни Вальденстрёма, циррозе печени, билиарном циррозе печени, гепатитах, малярии, лепре, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Почти в 10% случаев антинуклеарный фактор обнаруживают у здоровых людей, но в низком титре (не более 1:50).

В последние годы был разработан иммуноферментный метод определения антинуклеарных антител различного спектра, который отличается простотой выполнения и постепенно вытесняет иммунофлюоресцентный метод.

Целый ряд лекарств может приводить к ложноположительному повышению титра антинуклеарных антител: аминосалицилаты, карбамазепин, изониазид, метилдопа, прокаинамид, иодиды, пероральные контрацептивы, тетрациклины, тиазидные диуретики, сульфаниламиды, нифедипин, β-адреноблокаторы, гидралазин, пеницилламин, нитрофурантоин и др., вследствие способности этих препаратов вызывать интерференцию при проведении исследования.

[1], [2], [3], [4],